A Ducati Corse Media apresenta uma atualização sobre a impressionante performance de Francesco Bagnaia em Assen. Mais uma vez, ele terminou no topo da classificação da MotoGP na sessão anterior à qualificação. Logo atrás estão Maverick Vinales e Pedro Acosta. O atual campeão demonstrou sua confiança ao marcar um tempo competitivo de 1.31.670s, com apenas 0.321s separando os três primeiros pilotos. Esta última sessão de prática permitiu que os pilotos testassem suas configurações para a corrida Sprint mais tarde no dia, com a qualificação ocorrendo imediatamente em seguida.
Infelizmente, Marco Bezzecchi, o vencedor da corrida Sprint de 2023, enfrentou dificuldades. Ele saiu da pista e teve uma queda em alta velocidade na Curva 7, deixando-o perplexo sobre a configuração de sua moto. Raul Fernandez, da Trackhouse, também perdeu o controle na mesma curva, espelhando o acidente de Bezzecchi. Como resultado, a sessão de prática foi interrompida devido a cascalho na linha de corrida na Curva 7, garantindo a segurança dos pilotos.
Com apenas dez minutos restantes, todos os pilotos foram para a pista para maximizar seus tempos de volta. Vinales continuou a demonstrar sua velocidade bruta, desafiando o líder Bagnaia da equipe de fábrica da Ducati. A sensação novata Acosta também marcou seu melhor tempo de volta do fim de semana até agora. Marc Marquez optou por um pneu traseiro macio em sua volta final, melhorando seu desempenho em todos os setores, mas escolhendo abortar a volta. Ele garantiu a quarta posição, seguido por Jorge Martin e Franco Morbidelli, da equipe Pramac.
Fabio Di Giannantonio manteve sua forte competitividade, terminando em sétimo lugar geral. Alex Marquez seguiu de perto, terminando apenas 0.009s atrás em oitavo. Apesar de sua queda anterior, Fernandez conseguiu garantir a nona posição, à frente do piloto da fábrica Aprilia, Aleix Espargaro. Fabio Quartararo, da Yamaha, terminou em 11º lugar, com Jack Miller, da KTM, e Enea Bastianini, da Ducati de fábrica, logo atrás.
Marco Bezzecchi, que enfrentou possíveis lesões devido à sua queda, terminou em 14º, um segundo atrás do líder. Brad Binder teve uma performance decepcionante, terminando em 15º lugar. Miguel Oliveira terminou em 16º em sua moto Trackhouse, à frente do campeão de 2020, Joan Mir, que mostrou melhora com um 17º lugar pela Honda. Alex Rins mais uma vez teve dificuldades na Yamaha, terminando em 18º lugar, enquanto Johann Zarco representou a equipe LCR Honda na 19ª posição. O piloto convidado da Aprilia, Lorenzo Savadori, separou as LCR Hondas, com Taakaki Nakagami em 21º lugar. Luca Marini terminou penúltimo, enquanto Augusto Fernandez concluiu a corrida com uma performance decepcionante.