Francesco Bagnaia, le champion actuel de MotoGP, a terminé premier lors de la séance d’entraînement de vendredi à Mugello, avec Alex Rins de Yamaha à la deuxième place. Le temps au tour de Bagnaia de 1m44.938s était plus d’un quart de seconde plus rapide que le reste du peloton, juste en dessous du nouveau record de piste. Cependant, Bagnaia est actuellement sous enquête pour avoir entravé Alex Marquez pendant la séance. Malgré cela, la forte performance de Yamaha à Mugello s’est poursuivie, avec Rins montrant sa vitesse et le rookie Pedro Acosta assurant une place en Q2. La chute précédente d’Acosta n’a pas entravé ses progrès. Brad Binder de KTM a également réalisé un temps au tour prometteur, mais a été exclu en raison des limites de la piste. Miguel Oliveira de Trackhouse Aprilia a réalisé sa meilleure performance de la saison jusqu’à présent, terminant à la quatrième place. Marc Marquez de Gresini Ducati a réussi à éviter l’élimination de Q1 avec le cinquième temps le plus rapide. D’autres performances notables sont venues d’Enea Bastianini, Jorge Martin et Alex Marquez, tous roulant sur des Ducatis. Maverick Vinales et Aleix Espargaro ont sécurisé les dernières places en Q2 avec leurs Aprilias. Fabio Quartararo de Yamaha a terminé un quart de seconde derrière Rins, évitant de justesse la participation à Q1. Takaaki Nakagami de Honda a eu une performance impressionnante, dépassant ses coéquipiers de RC213V de plus de quatre dixièmes de seconde.